masson染色服務氏染色時膠原纖維呈藍色(被苯胺藍所染)或綠色(被亮綠所染),肌纖維呈紅色(被酸性品紅和麗春紅所染),這與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關。如已固定的組織用一系列陰離子水溶性染料先后或混合染色,則可發(fā)現(xiàn)紅細胞被最小分子的陰離子染料著染,肌纖維與胞質(zhì)被中等大小的陰離子染料著染,而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染。由此說明了紅細胞對陰離子染料的滲透性最小,肌纖維與胞質(zhì)次之,而膠原纖維。
該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關,分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
masson染色服務試劑:
Regaud 氏蘇木精:蘇木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸餾水80ml。
將蘇木精加入蒸餾水內(nèi)加溫溶解,冷卻后加入酒精和甘油,放數(shù)日后即可應用。
Masson麗春紅酸性復紅液: 麗春紅0.7g,酸性復紅0.3g,蒸餾水99ml,冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液: 冰醋酸0.2 ml,蒸餾水100 ml。
1%磷鉬酸水溶液:磷鉬酸1g,蒸餾水100 ml。
苯胺藍水溶液:苯胺藍2g,蒸餾水98 ml,冰醋酸2 ml。
1%光綠水溶液:光綠 1g,蒸餾水100 ml。
masson染色服務三色法步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水。
2. 鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。
3. 依次自來水和蒸餾水洗。
4. 用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精染核5-10min。
5. 充分水洗,如過染可鹽酸酒精分化。
6. 蒸餾水洗。
7. 用Masson 麗春紅酸性復紅液5-10min。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 1%磷鉬酸水溶液分化3-5min。
10. 不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍或光綠液染5min。
11.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12.95%酒精、*、二甲苯透明、中性樹膠封固。
結果:膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色,胞核黑藍色。
masson染色服務體會與說明:
1.控制好染色步驟。
2.組織固定起著很重要的作用,根據(jù)不同的固定液可延長或縮短染色時間。
3.0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色調(diào)清晰鮮艷。
4.磷鉬酸水溶液對麗春紅、酸性復紅有分化作用,分化時鏡下控制, 肌纖維和纖維素呈紅色,膠原纖維呈淡粉紅色即可。
送樣運輸要求:
1.樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。切勿固定時間過長,切勿冷凍結冰。
2.石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。